大鼠心肌細胞H9C2
l細胞背景
B.Kimes and B.Brandt從源于BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆了H9c2(2-1)細胞株,它表現許多骨骼肌的特性。這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管。如果培養基中的血清濃度下降到1%,融合發生得很快。
l細胞特性
1)來源:心臟
2)形態:成肌細胞,貼壁生長
3)含量:>1x106細胞數
4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
l培養條件:
1)準備DMEM(含1.5g/L NaHCO3推薦:awcell-128-0001)或(GIBCO,貨號12800017,添加NaHCO3 1.5g/L)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
l注意事項:
注意:大鼠心肌細胞H9C2該細胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養基中生長良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培養基培養細胞時需要提高CO2濃度(7%-10%)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10?S的培養基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
http://www.syongsci.com/Products-36298498.html
https://www.chem17.com/st484218/product_36298498.html
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